分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/28 13:36:16
分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染
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分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染
分子量120kDa,转膜条件求助
最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~
半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有
湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染胶都有蛋白,还要再延长时间么……加到250mA~300mA,还是没做出来;PVDF膜,300mA 2h,试了两次,之前用甲醇泡过15-20min激活的,膜有点花,转完膜染胶还是有残留,染膜没怎么看到蛋白,也有注意用冰袋降温了……marker转膜完能看到,脱脂牛奶封闭2h以后膜的颜色不花了,但是marker看不清楚了……
之后一抗santa 1:200 4℃过夜,二扛ICL 1:5000
β-actin用半干转一直都很好,总感觉目的条带不出来可能问题在转膜上,
1、我的转膜条件是不是有问题,如果是,需要怎么调整?
2、湿转液配的时候,120KD需要加SDS么?

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我在网上搜了一下,蛋白质从凝胶转印至膜
1 )半干电转移法
1. 用蒸馏水淋洗半干装置的平板电极.…
具体的你看看这个.

你是做什么用,我来帮你想办法。

分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染 分子量120kDa,转膜条件求助最近一个月,蛋白一直做不顺,蛋白分子量120KD,转膜时间2H~半干转:切NC膜4.5cm*1.5cm,转膜电流7mA,2h~转完染膜染胶,上面什么都没有湿转:NC膜 转膜电流250mA,2h~转完染膜染 western blot湿转用什么膜,PVDF还是NC?分子量120kDa的~ 你转过大分子量的蛋白么?比如270KDa的?湿转的转膜条件是什么啊?我用200mA转了2.5个小时结果都没转上 蛋白质分子量为10kDa,其直径大约有多大?100kDa呢? 求助一个条件公式 一蛋白质谱测定分子量10kDa,但是SDS-PAGE测的结果是21kDa,可能原因是什么? 求助:聚乙烯醇的分子量? 求助一个Excel条件公式 求助一个条件求和公式 哪个公司有分子量在600Kda的蛋白质marker,便宜一点的, 为什么脂肪酶蛋白经SDS-PAGE测得的分子量为约42KDa? PSS(聚苯乙烯磺酸钠) 分子量70kDa,与物质的量能换算吗?一 测定一个分子量为100KDa的蛋白质一级结构,最好的方法是A.DNFB法; B.氨肽酶法; C.PITC法; D.基因序列测定法; E.质谱法;给出原因 【求助】GPC如何测低分子量聚合物的分子量 蛋白质跑电泳想让小分子量跑出去,我的蛋白分子量为170kda,用的10%的分离胶,100v恒压跑该怎么办? kda是什么 kda是什么