作业帮1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/06/14 04:02:37
1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?
1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?
1 用PCR仪扩增细胞的DNA,所用的试剂和样品是什么?其循环条件是什么?
样品 可以用细胞 也可以用细胞里提取的DNA
试剂 DNA聚合酶（依赖于你的目的选择普通Taq酶还是高保真Taq酶）
DNA聚合酶附带的缓冲液,MgCl2（可能有可能没有,没有的一般是公司添加到额缓冲液里了）
dNTP：四种脱氧核糖核苷酸
无菌水
循环条件:95℃ 10min
95℃ 30sec
55℃（取决于你的引物的退火温度,可以用梯度PCR摸索） 30sec total 25~35 cycle
72℃ 60sec（时间取决于你的酶的扩增效率与要扩增片段的长度,酶的说明书上有）
72℃ 10min
4℃ hold
试剂与样品：模板DNA,buffer（包含有Mg+），dNTP,引物，DNA聚合酶。
循环条件，根据你的目的产物的片段大小，及引物的退火温度，都不一样的我之前用过的一个程序是这样的
95℃ 5min
95℃ 30sec
57℃ 30sec total 35 cycle
72℃ 60sec
72℃ ...
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试剂与样品：模板DNA,buffer（包含有Mg+），dNTP,引物，DNA聚合酶。
循环条件，根据你的目的产物的片段大小，及引物的退火温度，都不一样的我之前用过的一个程序是这样的
95℃ 5min
95℃ 30sec
57℃ 30sec total 35 cycle
72℃ 60sec
72℃ 5min
4℃ forever
收起
模板DNA，四种dNTP原料(ATP.CTP.TTP.GTP)，引物，Taq酶。一般来说，在酶未饱和、原料充足的情况下，PCR可循环。