肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/05/01 23:11:02
肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位
xSNA~`SX~OfMi HLYW.1hZZl"Re]93˕гR륽Nfwf‰Y"33Ԉ~!)+~|6R_,8(.V"LΙQgf^4OwNEs.%@3h| Z T5+Ǫ9!U#N@o>zLBT1IKqɒ$ɲ(HVwG_=ӝ8RèMb *G,Q IۜW /ozQ}o7fD1D?%z{5]Ō, 1qO|{S)4zt,? ʤ=um؜) -ޣӎg c]a<4t?7 UJCCg"}!2.y=ڣZ:^~m؛ b귦Z2`^]e{$w0XWi8u <7Vs0}Ʉ} u

肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位
肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序
快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.
F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点
G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位点
atf2基因,有两个isoform,一个1441bp,一个1321bp.
PCR程序如下:
94℃ 5min,
94℃ 30s,65℃30s,68℃2min,这里14个循环直至退火温度降到60℃,
接下来94℃30s,60℃35s,72℃2min,这里一共35个循环,
最后72℃10min.
哪里不对吗?
PCR是50uL体系,模板加了1ul

肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位
RNA提质量怎么样?CDNA模板浓度,引物浓度,退火温度都有比较大的影响,需要自己摸索

肝脏组织中atf2 基因cDNA的PCR程序快纠结死我了,我用以下程序跑电泳出来的结果几乎总是弥散,看不到目的条带.F:CCGAGATCTatgagtgatgacaaaccctttctat 有BGI2 酶切位点G:CCGGTTAACtcaacttcctgagggctgtg 有HPA1 酶切位 我想做胰岛素导入大肠杆菌的基因克隆实验.在ncbi中查找到了cdna,准备跑pcr,这个时候需要提取出cdna模需要从人体中提取cdna模版吗?还是去基因公司合成基因片段比较好?pcr可以只提供基因序列, pcr 模板 全部rna转录出来的cdna好 还是直接买来的基因的cdna好 cDNA文库和基因组文库中基因来源的区别 组织提取的cDNA和细胞提取的cDNA用同一引物PCR扩增出来的条带长度不一样,是什么原因?有什么方法改进吗 刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因吗?或者,获得的cDNA 是不 pcr,cDNA引物的问题用真核细胞mRNA反转录出来的cDNA来做引物进行pcr扩增,模板DNA是什么呢?如果是真核细胞中提取的DNA,那不也是有内含子的么?那我怎么来得到目的基因呢?第一个的意思是,在做m 针对mRNA上的某个基因设计逆转录PCR的引物,逆转录时得到的cDNA只是这个基因的cDNA吗?如果不是,那还会包括它下游的所有基因的cDNA,还是包括它所在的操纵子的其他基因的cDNA? 应用Oligo (dT) 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因吗?或者,获得的cDNA 是不是扩增的总RNA刚接触PCR不久,1、在RNA逆转录获cDNA 应用Oligo (dT)18 作为引物,合成的cDNA含有目的基因和内参基因 获得目的基因的方法有多种,以下获得目的基因的方法中,得到的基因与DNA中的实际碱基序列差异最大的是:A:利用PCR技术扩增目的基因B:从基因组文库中获得的目的基因C:从cDNA文库中获得 双酶切鉴定(或者测序)是否含有目的基因的时候,为何用pMD18-T载体?过程主要是:从小麦胚胚芽鞘中提出总的RNA,反转录cDNA,然后纯化cDNA,特异性PCR扩增,电泳,得到目的基因,然后连接载体pMD18-T 已知某一基因的cDNA序列,设计一实验从RNA中获得这cDNA片段并述原理 kb cDNA CTK PCR 获取目的基因的方法有多种,下列不属于目的基因的获取方法的是 A从基因组文库中获取 B从cDNA文库中获取C从含目的基因生物细胞中获取 D利用PCR技术获取 荧光PCR的cDNA的量不同会影响结果吗有一个组的基因特别少.但是做出结果了,不是长度,是量 cDNA是双链么real time PCR为何用cDNA 而不是用直接提取的DNA做 急!请问根据小麦小G蛋白的cDNA基因设计引物,用小麦总DNA作为模板,用PCR能扩增出小麦小G蛋白的基因片...急!请问根据小麦小G蛋白的cDNA基因设计引物,用小麦总DNA作为模板,用PCR能扩增出小麦小G 您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?您好!我需要从cDNA调取一段基因,引物已经设计好,在PCR过程中不知如何调整体系,P不出目的条带?