求CTAB的配方

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/11/01 07:25:44
求CTAB的配方
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求CTAB的配方
求CTAB的配方

求CTAB的配方
提取DNA配方
CTAB为十六烷基三甲基溴化铵,
CTAB提取缓冲液的经典配方
Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏;
EDTA螯合Mg2+或Mn2+离子,抑制DNase活性;
NaCl 提供一个高盐环境,使DNP充分溶解,存在于液相中;
Cβ-巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA.
CTAB 4g
NaCl 16.364 g
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)
0.5M EDTA 8ml,先用70ml ddH2O溶解,再定容至200ml灭菌
冷却后0.2-1% 2-巯基乙醇(400ul)氯仿-异戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml异戊醇,摇匀即可.
提取RNA配方
2% CTAB(W/V)
2% 聚乙烯吡咯烷酮PVP(W/V)
100 mM Tris-HCl(pH8.0,DEPC处理的水配置)
25mM EDTA
0.5g/L 亚精胺Spermidine
2.0M NaCl,2%巯基乙醇(V/V,使用前加入)
由于在高温灭菌条件下,Tris-HCl要和DEPC发生反应,所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可.