作业帮总氮 紫外分光光度法测定时空白偏高检测地表水的总氮时,空白在220纳米时吸光度总是超过0.3,一般来说空白也就0.03左右.使用的比色皿是尤尼科2100型配套的,实验用水均是新鲜的蒸馏水,药品
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/02 16:18:55
总氮 紫外分光光度法测定时空白偏高检测地表水的总氮时,空白在220纳米时吸光度总是超过0.3,一般来说空白也就0.03左右.使用的比色皿是尤尼科2100型配套的,实验用水均是新鲜的蒸馏水,药品
总氮 紫外分光光度法测定时空白偏高
检测地表水的总氮时,空白在220纳米时吸光度总是超过0.3,一般来说空白也就0.03左右.使用的比色皿是尤尼科2100型配套的,实验用水均是新鲜的蒸馏水,药品配置如下：
1）4克过硫酸钾+1.5克氢氧化钠,配置成100ml
2)20ml浓盐酸稀释到200ml
121度,消解30分钟.
我将蒸馏水+1ml配制的盐酸溶液定容到25ml,在220纳米测定吸光度是0.008.将问题空白稀释10倍,吸光度是0.052,说明仪器正常,测定前也预热过1小时.为了保险,我在技术指导的监督下再做了一次,结果还是这样的.后来怀疑是新买的过硫酸钾的问题,重新买了试剂,是上海的,和最早的厂家一样.请问大家有什么经验指导?
1.我的比色皿是石英的，厂家配套的
2.空白加入10毫升蒸馏水，5毫升碱性过硫酸钾，121度，消解30分钟，冷却到室温，加入1毫升1+9盐酸，定容到25毫升。220/275纳米测定
总氮 紫外分光光度法测定时空白偏高检测地表水的总氮时,空白在220纳米时吸光度总是超过0.3,一般来说空白也就0.03左右.使用的比色皿是尤尼科2100型配套的,实验用水均是新鲜的蒸馏水,药品
1.How do you prepare your blank?
2.what is the material of your 比色皿?
Answer:
这半年测总氮感觉挺有收获 基本把问题弄清楚了 所以也来分享一下
1、过硫酸钾提纯
我觉得这个方法测总氮的主要问题就是过硫酸钾含氮 去年我测试的时候,吸光度甚至达到了4 -_-|| 现在想想真是太恐怖了
听说国外的过硫酸钾没问题 但是实在太贵,另外我也不是完全确定肯定是过硫酸钾的问题,所以我选择重结晶提纯过硫酸钾
在1升广口瓶加入约800mL水,50摄氏度水浴锅加热,然后逐渐加入过硫酸钾,直至不能溶解为止,这个过程挺漫长-_-||
然后把完全溶解的饱和溶液放在室温中自然冷却（选用广口瓶有盖,重结晶过程避免引入其他污染）,再放进四度冰箱重结晶,建议同时用另一个广口瓶冰一瓶去离子水,重结晶一夜后,倒掉上清液然后用冰好的去离子水清洗几遍,我觉得这样效果更好（重结晶的晶体会结成一块沉在瓶底,但其实结构很松散,用钢勺什么的弄两下就离散开了,然后再清洗）.我一般都重结晶两次.
洗净后倒掉上清液,然后放入50摄氏度烘箱烘干即可（用广口瓶烘干比较慢,可以转移到烧杯）.
上次结晶了约170克回收了约60克,还比较满意,比买国外的便宜多了!
2、其他药品
去年有大人说氢氧化钠以及盐酸都有影响,但是我都是用的一般分析纯药品,没有造成特别大的影响,应该没问题.
3、消解过程
我选择消解温度为124摄氏度左右,有大人说要避免跟生物实验室公用灭菌锅,会混入污染,不过遗憾的是我们实验室就是生物实验室-_-|| 但是我这半年做的基本没啥问题,消解的时候比色管盖严,用布和绳子把盖子扎严实,基本问题不大.
4、测试
测试的时候要加入1ml 1:9盐酸,我觉得盐酸跟过硫酸钾的反应可能需要一段时间,所以我都是加入盐酸后过几个小时再测试,结果很稳定.
5、结果
现在测试的空白220与275相减后基本都在0.01-0.02（220在0.04 275在0.01左右）,对于我的实验精度已经足够了,标准曲线r=0.9997,不算特别好,但是跟去年空白吸光度4相比,我已经非常非常满足了
6、其他
实验过程中加碱性过硫酸钾的时候一定要避免加在瓶口处,另外消解前混匀样品千万不要倒转比色管,否则消解后会导致比色管打不开,惨痛教训!建议使用50ml比色管,容易混匀!
另外,测试过程中发现比色管的质量影响实验结果!